Płeć komórkowa rzadko jest uznawana za biologiczną zmienną w badaniach przedklinicznych, nawet jeśli bada się patogenezę chorób o przewidywalnych różnicach płciowych. W tej perspektywie, proteomika, i "omics" podejścia w ogóle, może dostarczyć potężnych narzędzi do uzyskania kompleksowych map komórkowych, sprzyjając w ten sposób odkryciu jeszcze nieznanych fizjo-patologicznych mechanizmów płciowych.

Methods

Wykonywaliśmy analizy proteomiczne i ontologiczne genów (GO) sekretu z pozbawionych surowicy ludzkiej męskich i żeńskich komórek śródbłonka (ECs), a następnie walidację ELISA. Apoptozę wykryto za pomocą technik FACS i Western blot oraz efferocytozę poprzez zdolność linii komórek makrofagów RAW 264.7 do pochłaniania apoptotycznych ECs. Poziomy PTX3 mRNA mierzono metodą RT-qPCR.

Results

Proteomiczne i GO analizy sekretu z zagłodzonych EC mężczyzn i kobiet wykazały znaczne wzbogacenie w białka związane z komórkowymi reakcjami na stres i regulacją apoptozy w sekrecie EC mężczyzn. Odpowiednio, wyższy odsetek EC mężczyzn poddanych apoptozie w odpowiedzi na deprywację surowicy w porównaniu z EC kobiet. Wśród wydzielanych białek wiarygodnie stwierdzono wyższy poziom PTX3 w męskim sekrecie EC. Wyciszenie PTX3 sugerowało, że dla prawidłowego przebiegu procesu efferocytotycznego EC mężczyzn były zależne od jego ekspresji. W przeciwieństwie do tego, żeńska efferocytoza EC wydawała się być niezależna od ekspresji PTX3.

Conclusions

Nasz wynik wykazał, że EC mężczyzn i kobiet z surowicy mają różne fenotypy sekrecyjne, które mogą brać udział w seksualnej odpowiedzi na stres komórkowy. Zidentyfikowaliśmy PTX3 jako kluczowy czynnik w męskiej odpowiedzi śródbłonka na wyzwalacz apoptotyczny. Ta nowa i powiązana z płcią rola wydzielanych białek, a głównie PTX3, może otworzyć drogę do odkrycia wciąż nieznanych mechanizmów specyficznych dla płci i celów farmakologicznych w zakresie zapobiegania i leczenia dysfunkcji śródbłonka w momencie wystąpienia miażdżycy i choroby sercowo-naczyniowej.

Read the complete study.