O sexo celular raramente tem sido considerado como uma variável biológica na investigação pré-clínica, mesmo quando se estuda a patogénese de doenças com diferenças sexuais previsíveis. Nesta perspectiva, a proteómica, e as abordagens "ómicas" em geral, podem fornecer instrumentos poderosos para obter mapas celulares abrangentes, favorecendo assim a descoberta de mecanismos fisiopatológicos ainda desconhecidos em termos de sexo.

Métodos

Realizámos análises proteómicas e genéticas (GO) do segredo das células endoteliais masculinas e femininas (EC) com privação de soro humano, seguido de validação ELISA. A apoptose foi detectada por técnicas FACS e Western blot e eferocitose através da capacidade da linha de células macrofágicas RAW 264,7 de engolir ECs apoptóticas. Os níveis de mRNA PTX3 foram medidos por RT-qPCR.

Resultados

Análises de proteómica e GO do secretoma das CEs humanas esfomeadas masculinas e femininas demonstraram um enriquecimento significativo em proteínas relacionadas com respostas celulares ao stress e à regulação da apoptose no secretoma das CEs masculinas. Consequentemente, uma maior percentagem de ECs masculinos foi submetida à apoptose em resposta à privação de soro em comparação com os ECs femininos. Entre as proteínas secretadas, encontrámos de forma segura níveis mais elevados de PTX3 no secretoma de EC masculino. O silenciamento de PTX3 sugeriu que os ECs masculinos estavam dependentes da sua expressão para realizar correctamente o processo eferocitótico. Em variação, a eferocitose de CE feminina parecia ser independente da expressão de PTX3.

Conclusões

Os nossos resultados demonstraram que as CEs masculinas e femininas sedentas de soro possuem diferentes fenótipos secretos que podem participar na resposta tendenciosa do sexo ao stress celular. Identificámos o PTX3 como um actor crucial na resposta endotelial específica masculina a um gatilho apoptótico. Este papel inovador e relacionado com o sexo para as proteínas secretadas, e principalmente para o PTX3, pode abrir caminho à descoberta de mecanismos ainda desconhecidos e de alvos farmacológicos específicos do sexo para a prevenção e tratamento da disfunção endotelial no início da aterosclerose e da doença cardiovascular.

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