Vesículas extracelulares (EVs) são partículas de tamanho nanométrico segregadas pela maioria das células. Os VE transportam ácidos nucleicos que se mantêm promissores como potenciais biomarcadores em várias doenças.

Vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (VIH) infecta células T CD4+ e induz disfunção imunológica, inflamação, e secreção EV, mas pouco se sabe sobre a pequena carga de ARN EV em relação à desregulação imunitária em indivíduos infectados com VIH. Aqui, caracterizamos pequenos RNA transportados por EV circulantes em indivíduos HIV positivos em terapia anti-retroviral (ART) relativamente a controlos não infectados por sequenciação de RNA da próxima geração.

Resultados

Os EVs de plasma isolados de indivíduos HIV positivos e HIV negativos em teste (n = 24) e coortes de validação (n = 16) foram caracterizados por microscopia electrónica, análise de rastreio de nanopartículas, e immunoblotting para marcadores de exosomas. Os EV eram mais abundantes no plasma de sujeitos seropositivos em comparação com sujeitos seronegativos. Pequenas sequências de RNA de EVs de plasma na coorte do teste identificaram diversas pequenas espécies de RNA, incluindo miRNA, piRNA, snRNA, snoRNA, tRNA, e rRNA, sendo o miRNA o mais abundante. Foi detectado um total de 351 diferentes miRNAs em EVs de plasma, com os 50 miRNAs superiores a representar 90% de todas as leituras de miRNA. miR-26a-5p foi o miRNA mais abundante, seguido de miR-21-5p e miR-148-3p. A análise qRT-PCR mostrou que seis miRNAs (miR-10a-5p, - 21-5p, -27b-3p, - 122-5p, -146a-5p, - 423-5p) foram significativamente aumentados em EVs de plasma de indivíduos seropositivos em comparação com indivíduos seronegativos na coorte de validação. Além disso, miR-21-5p, -27b-3p, -146a-5p, e - 423-5p correlacionaram positivamente com marcadores metabólicos de stress oxidativo e negativamente com ácidos gordos polinsaturados anti-inflamatórios. A sobre-representação e a análise do enriquecimento da via dos miRNAs e dos seus genes alvo previram a associação funcional com as respostas ao stress oxidativo, a sinalização gama de interferão, a sinalização tipo Toll-like receptor, a sinalização beta TGF, e a sinalização Notch.

Conclusões

Os indivíduos HIV-positivos na ART têm aumentado a abundância de EVs circulantes transportando diversos pequenos RNAs, sendo os miRNAs os mais abundantes. Vários MiRNAs associados à inflamação e ao stress oxidativo estão aumentados nos VE circulantes de indivíduos seropositivos, representando potenciais biomarcadores de vias de carga que contribuem para a patogénese da doença.

ler o estudo completo

Connexion